Immunohistokemiallisten värjäysten digitaalinen verifiointiarkisto patologian laboratorioon ja vasta-aineiden Pit-1, SF-1 ja T-Pit verifiointi

Abstract

Immunohistokemia on kustannustehokas ja nopea tutkimusmenetelmä, jota hyödynnetään patologian laboratoriossa esimerkiksi syöpätautien diagnostiikassa, ennusteen laatimisessa ja hoitovasteen arvioimisessa. Diagnostisessa patologian laboratoriossa on käytössä satoja vasta-aineita. Immunohistokemiallisen vasta-aineen toiminta diagnostiikassa on ennen käyttöön ottamista todistettava ja dokumentoitava, eli verifioitava. Tässä tutkielmassa luotiin palvelimelle päivittäiseksi työkaluksi patologeille ja sairaalasolubiologeille digitaalinen verifiointiarkisto, josta voi tarkistaa kunkin vasta-aineen käyttöaiheen ja värjäyspatterin. Digiarkistoon päivitettiin keskeisimmät diagnostisten immunohistokemiallisten vasta-aineiden verifointiraportit, ja digitoitiin raportteihin kuuluvat normaali- ja tuumorikudosverifiointilasit mikroskooppiskannerin avulla. Verifiointiarkiston rakentumista demonstroitiin tässä tutkielmassa verifioimalla aivolisäkkeen etulohkon soluista peräisin olevien rauhaskasvaimien, adenoomien, diagnostiikkaan tarkoitetut uudet transkriptiofaktorivasta-aineet Pit-1, SF-1 ja TPit, joita WHO:n aivolisäkkeen neuroendokriinisten kasvainten nykyluokitus vaatii täsmällisen diagnoosin asettamiseksi, ja aivolisäkkeen hormoneja tuottavien solutyyppien erottamiseksi. SF-1 -vasta-aineen todettiin tässä tutkimuksessa värjäävän adenoomia, joiden odotettiin värjäytyvän vain Pit-1 - vasta-aineella. Kaksoispositiivisten Pit-1- ja SF-1 -adenoomien esiintyminen on mahdollista, mutta ne ovat harvinaisia. Aivolisäkeadenoomien täsmällinen luokittelu on tärkeää potilaiden seurannan ja riskiarvioinnin kannalta.

Immunohistochemistry is a cost-effective and fast research method that is used, for example, in the diagnosis of cancer diseases, preparing a prognosis and evaluating the response to treatment in the pathology laboratory. Hundreds of antibodies are used in the diagnostic pathology laboratory. The function of an immunohistochemical antibody must be proven and documented, in other words verified, before using in the diagnostics. In this thesis, a digital verification archive was created on the server as a daily tool for pathologists and medical cell biologists. The indication and the staining pattern for each antibody can be checked from the archive. The most important diagnostic immunohistochemical antibody verification reports were updated in the digital archive, and the normal and tumor tissue verification glasses included in the reports were digitized using a microscope scanner. The verification archive was demonstrated in this thesis by verifying the new transcription factor antibodies Pit-1, SF-1 and T-Pit, intended for the diagnosis of glandular tumors (adenomas) originating from the cells of the anterior pituitary lobe. The antibodies are required by the current WHO classification of pituitary neuroendocrine tumors to establish an accurate diagnosis, and to distinguish cell types producing pituitary hormones. In this study, the SF-1 antibody was found to stain adenomas, that were expected to be stained only with the Pit-1 antibody. There are double-positive Pit-1 and SF-1 adenomas, but they are uncommon. Accurate classification of pituitary adenomas is important for patient monitoring and risk assessment.