Haku
Aineistot 1-10 / 195
Human Parvovirus B19 Induced Apoptotic Bodies Contain Altered Self-Antigens that are Phagocytosed by Antigen Presenting Cells.
(Public Library of Science, 2013)
Human parvovirus B19 (B19V) from the erythrovirus genus is known to be a pathogenic virus in humans. Prevalence of B19V infection has been reported worldwide in
all seasons, with a high incidence in the spring. B19V is ...
Immune tolerance disruption by human parvovirus B19 viral infection mechanisms
(2013)
Virusinfektioita pidetään kasvavissa määrin suurimpana ympäristöperäisenä syynä, joka vaikuttaa autoimmuunisairauksien kehitykseen ja autoimmuniteetin muodostukseen. Esimerkiksi parvovirus B19 (B19V) on yhdistetty punahukkaan sekä nivelreumaan. On todettu, että B19V:n ei-rakenteellinen proteiini 1 (NS1) aiheuttaa apoptoosia soluissa, jotka eivät tavallisesti ole B19V infektion kohteena. Lisäksi hiljattain on osoitettu, että apoptoosin seurauksena muodostuvat apoptoottiset kappaleet kykenevät esittelemään antigeenejä niitä esittelemään erikoistuneille soluille, kuten makrofageille tai dendriittisoluille. Tämän tutkimuksen tarkoituksena on löytää B19V infektioon liittyviä autoantigeenejä sekä tarkastella NS1:n aiheuttamaa immuunivastetta. Tätä varten NS1 on yhdistetty vihreään fluoresoivaan proteiiniin (EGFP) ja kloonattu bakulovirusvektoriin sytomegaloviruksen välittömän aikaisen promoottorin alle. Tämän jälkeen näitä yhdistelmä-bakuloviruksia lisättiin Sf9-hyönteissolulinjan avulla. Tällä tavoin tuotettua virusta käytettiin ihmisen maksasta peräisin olevien HepG2-solujen transduktiossa. Kyseisen transduktion tehokkuus mitattiin virtaussytometrillä, hyödyntäen EGFP-signaalia merkkinä onnistuneesta transduktiosta. Transduktion tehokkuuden perusteella määritettiin viruskannasta sellainen tilavuus, mikä tuottaa 70 prosentin transduktion. Tätä tilavuutta käytettiin apoptoottisten kappaleiden tuotannossa. Apoptoottiset kappaleet puhdistettiin ensin suodattamalla ja koottiin sitten pelleteiksi ultrasentrifugilla. Kootuista apoptoottisista kappaleista immunoleimattiin tumaperäiset antigeenit apolipoproteiini H (ApoH), histoni 4 (H4), histoni 2B (H2B), lysosomiin liittyvä kalvoproteiini 2 (Lamp2), Ku80 ja Smith. Kaikki tumaperäiset antigeenit, poissulkien H2B, löydettiin apoptoottisista kappaleista yhdessä NS1 kanssa. Tumaperäisten antigeenien löytyminen apoptoottisista kappaleista saattaa aiheuttaa häiriön immunitoleranssissa, mitä tutkittiin seuraavaksi hyödyntäen antigeenejä esitteleviä soluja. Tähän tarkoitukseen valittiin akuutista monosyyttisesta leukemiasta peräisin olevat ihmisen monosyytit (THP-1), jotka erilaistettiin forboli-12-myristaatti-13-asetaatilla (PMA). Soluja viljeltiin PMA:a sisältävällä kasvatusalustalla ensin kolme päivää ja viljelyä jatkettiin vielä erilaistumisen varmistamiseksi puhtaalla alustalla viiden päivän ajan. Seuraavaksi THP-1 soluja stimuloitiiin apoptoottisilla kappaleilla ja niiden päätyminen solujen sisään varmistettiin konfokaalimikroskopialla. Koska erilaistetut THP-1 solut pystyivät ottamaan apoptoottisia kappaleita sisäänsä, tästä johtuvaa sytokiiniprofiilia tarkasteltiin vielä alustavasti tarkoitukseen sopivan kaupallisen tuotteen avulla. Mahdollisia immunologisia vaikutuksia tarkasteltaessa tultiin lopputulokseen, jossa ainoastaan yhden proteiinin, γ-interferonin indusoima proteiini 10:n (IP-10), läsnäolo erotti EGFP- ja EGFP-NS1-fuusioproteiinien avulla tuotetut näytteet kontrollinäytteistä. Vaikka B19V:n infektiomekanismien aiheuttamat häiriöt immunitoleranssiin vaativatkin vielä lisätutkimuksia, tässä tutkimuksessa saadut tulokset tukevat alkuperäistä hypoteesia. B19V NS1:n avulla tuotetut apoptoottiset kappaleet, jotka ovat peräisin soluissa, joita B19V ei tavallisesti infektoi, sisältävät autoantigeenejä ja nämä autoantigeenit voidaan esitellä immuunijärjestelmälle antigeenejä esittelevien solujen kautta....
that apoptotic bodies resulting from apoptosis can present antigens to antigen presenting cells (APCs) such as macrophages or dendritic cells. The aim of this study is to detect self antigens related to B19V infections and study the immune response caused by NS1...
that apoptotic bodies resulting from apoptosis can present antigens to antigen presenting cells (APCs) such as macrophages or dendritic cells. The aim of this study is to detect self antigens related to B19V infections and study the immune response caused by NS1...
Pathogenic mechanisms of how human parvovirus breaks self-tolerance
(University of Jyväskylä, 2017)
It is known that viral infections can cause acute, chronic, and autoimmune diseases
(ADs). However, the mechanism of how a persistent viral infection contributes to ADs
remains still unclear. In this thesis, pathological ...
Is HLA type a possible cancer risk modifier in Lynch syndrome?
(John Wiley & Sons, 2023)
immunogenic antigens. The immunogenicity of FSPs is dependent on the antigen presentation. One crucial factor determining antigen presentation is the HLA genotype. Hence, a LS carrier's HLA genotype plays an important role in the presentation of FSP antigens...
Borrelia burgdorferi Outer Membrane Vesicles Contain Antigenic Proteins, but Do Not Induce Cell Death in Human Cells
(MDPI AG, 2022)
proteins (Osps) A, B, and C, as well as DNA. However, the pathogenicity of BbOMVs in disease development is still unclear. In this study, we characterized purified BbOMVs by analyzing their size and immunolabeling for known antigenic markers: OspA, OspC, p...
Assembly of hepatitis B surface antigen
(1992)
Hepatitis B virus infected cells produce, in addition to v1nons, non-infectous particles composed of the major viral coat protein, hepatitis B surface antigen (HBsAg), and lipid. These particles are stabilized by extensive disulphide crosslinking...
Characterization and immunological aspects of Borrelia burgdorferi pleomorphic round bodies
(University of Jyväskylä, 2015)
Production, purification and evaluation of insect cell-expressed proteins with diagnostic potential
(University of Jyväskylä, 2008)
Patrik Michelin väitöskirjan aiheena on useiden erityyppisten rekombinanttiproteiinien tuotto, puhdistus ja karakterisointi. Rekombinanttiproteiinit ovat keskeisessä asemassa kehitettäessä uusia diagnostisia menetelmiä. Näiden proteiinien tuotossa organismiin lisätään muokattua vierasta geneettistä materiaalia, jotta organismi tuottaisi tavoiteltua proteiinia. Tuottoprosessit sisältävät puhdistusvaiheita, jotta haluttu proteiini voidaan eristää elävästä, monimutkaisesta lähtömateriaalista. Tuottoprosessissa on ainakin seuraavat vaiheet: tuotto-organismin kasvatus, rekombinanttiproteiinien tuotto isäntäsolussa ja lopputuotteen jälkikäsittely. Tämän jälkeen rekombinanttiproteiineja voidaan käyttää mm. entsyymiteknologiassa ja erilaisten tautien tunnistamisessa.Tutkimuksessa tuotettiin bakuloviruksen avulla hyönteissoluissa tulikärpäsen lusiferaasientsyymi, Epstein–Barr-viruksesta peräisin oleva Epstein–Barr-tuma-antigeeni-1 (EBNA-1) sekä ihmisen parvorokkoviruksen rakenneproteiinit VP1 ja VP2. Proteiinien kloonauksessa käytettiin tekniikkaa, jossa proteiinien amino- tai karboksyyliterminukseen lisättiin polyhistidiinihäntä (kuusi kertaa histidiiniaminohappo) vaikuttamatta lopputuotteen biologiseen aktiivisuuteen. Tämä tekniikka lyhensi puhdistusprotokollan muutamaan vaiheeseen.Michel käytti tutkimuksessaan uusia puhdistusprosesseja eristääkseen solusta lopputuotteita. Prosessissa pystyttiin todistamaan, että näin tuotetut proteiinit olivat yhtä aktiivisia kuin perinteisin puhdistusmetodein tuotetut. Tulikärpäsen lusiferaasientsyymi osoitettiin käyttökelpoiseksi ATP:n eli elävien organismien määrityksessä. Tuotettu Epstein–Barr-tuma-antigeeni-1 todistettiin olevan hyvä reagenssi Epstein–Barr-viruksen vasta-aineiden mittaamisessa. Epstein–Barr-virus voi aiheuttaa ihmisille mononukleoosin, kansanomaisemmin "pusutaudin". Viruksen kantaminen voi olla oireetonta, mutta aikuisella oireet voivat olla myös voimakkaat: korkeaa kuumetta, nielutulehdusta, lihaskipuja, imusolmukkeiden ja pernan suurenemista. Virus voi myös aiheuttaa erilaisia syöpäsairauksia, joista yleisin on lymfooma eli imusolmukesyöpä. Tutkimuksessa tuotettujen ihmisen parvorokkoviruksen rakenneproteiinien VP1 ja VP2 todettiin olevan potentiaalisia reagensseja parvorokkoviruksen vasta-aineiden määrittelyssä. Lapsilla tämä virus ilmenee ihottumana, joka alkaa punoituksena poskilla leviten muualle kehoon. Virus voi olla erityisen vaarallinen raskaana oleville, koska se lisää keskenmenoriskiä.Michelin tutkimus edistää diagnostisen rekombinanttiproteiinien saantia kehittäen puhdistusprosesseja, joissa proteiinit saadaan eristettyä solusta edullisesti, tasalaatuisesti ja lähes massatuotantona. Menetelmien kehitys on merkittävää erityisesti biolääketieteelliselle teollisuudelle. Työ osittaa, että menetelmien kehittämisellä voi olla merkittävää hyötyä teollisuudelle tuottomenetelmien tehostumisena....
-tagged proteins. IMAC can be coupled with expanded-bed adsorption chromatography (EBA) for large-scale applications. Here, the coleopteran firefly luciferase of Photinus pyralis, the Epstein-Barr virus (EBV) protein, the Epstein-Barr nuclear antigen-1 (EBNA-1...
-tagged proteins. IMAC can be coupled with expanded-bed adsorption chromatography (EBA) for large-scale applications. Here, the coleopteran firefly luciferase of Photinus pyralis, the Epstein-Barr virus (EBV) protein, the Epstein-Barr nuclear antigen-1 (EBNA-1...
Immunological characterization and engineering of the major latex allergen, hevein (Hev b 6.02)
(University of Jyväskylä, 2004)
Piia Karisola tutki luonnonkumiallergiaa välittömän (tyyppi I) allergian mallina. Hän keskittyi työssään luonnonkumiallergian pääallergeeniin, heveiiniin (Hev b 6.02), jota vastaan 70 %:lla luonnonkumiallergisista potilaista ...
Pleomorphic forms of Borrelia burgdorferi induce distinct immune responses
(Elsevier Masson; Institut Pasteur, 2016)
stimulated distinct cytokine and chemokine production in these cells. We confirmed that spirochetes and round bodies present different protein profiles and antigenicity. In a Western blot analysis Lyme disease patients had more intense responses to round...