Endosomal ions and serum promote enterovirus uncoating
Tekijät
Päivämäärä
2020Tekijänoikeudet
Julkaisu on tekijänoikeussäännösten alainen. Teosta voi lukea ja tulostaa henkilökohtaista käyttöä varten. Käyttö kaupallisiin tarkoituksiin on kielletty.
Enterovirusten B ryhmään kuuluva Echovirus 1 on RNA-virus, jonka tiedetään infektoivan soluja ei-happamien endosomien välityksellä ja kerääntyvän neutraaleihin multivesikulaarisiin kappaleisiin. Tämän tutkimuksen alussa oli olemassa hyvin rajallisesti tietoa fysiologisista tekijöistä, jotka johtavat enterovirusten avautumiseen. Tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää in vitro millainen yhdistelmä ioneja edistää echovirus 1:n avautumista fysiologisessa lämpötilassa. Päämääränä oli myös tutkia seerumin vaikutusta viruksen avautumiseen. Spektroskooppisissa mittauksissa käytettiin hyväksi SYBR Green II:n kykyä sitoutua viruksen RNA:han ja saada aikaan voimakasta fluoresenssia siinä tilanteessa, kun virus on avautunut vähän tai RNA on kokonaan vapautunut viruksen ulkopuolelle. Viruksen infektiivisyyttä erilaisten käsittelyjen jälkeen arvioitiin muun muassa sytopaattisen määrityksen avulla. Radioaktiivisesti leimatun viruksen avautumisen taso varmistettiin lopulta sakkaroosi- ja cesiumkloridigradienttierottelulla. Matala natriumpitoisuus yhdistettynä korkeaan kaliumpitoisuuteen edisti viruksen avautumista tämän tutkimuksen tulosten mukaan. Seerumilla havaittiin olevan myös viruspartikkelin avautumista ja genomin vapautumista edistävä vaikutus. Lisäksi tutkimuksessa tuli ilmi, että MgCl2 ja CaCl2 vakauttavat viruksen rakennetta. Tämä tutkimus paljasti uutta tietoa fysiologisista tekijöistä, jotka edistävät enterovirusten avautumista. Tutkimuksen tulosten pohjalta on mahdollista suunnitella uusia aihetta syventäviä jatkotutkimuksia.
...
Echovirus 1 (E1) belonging to the enterovirus B species is an RNA virus that enters non-acidic endosomes and accumulates in neutral multivesicular bodies. There was limited information about physiological triggers leading to uncoating of enteroviruses in the beginning of this study. The aim of this study was to evaluate in vitro what combinations of key ions promote uncoating of echovirus 1 at physiological temperature. Another aim of the study was to investigate the effect of serum on uncoating of the virus. Real-time fluorescence spectroscopy was used to measure the binding of SYBR Green II to viral RNA indicating the possible uncoating. End point dilution and cytopathic effect assay were performed to estimate viral infectivity after different treatments. Finally, sucrose and caesium chloride gradient separation of radioactively labeled virus was performed to confirm the state of uncoating. Low sodium concentration together with high potassium concentration induced the uncoating process according to our results. Addition of a small amount of serum enhanced the uncoating leading to the formation of the uncoating intermediate particle and genome egress. In addition, MgCl2 and CaCl2 prevented the uncoating process and, thus had a stabilizing effect in the assay. This study offered new information about molecular cues that trigger the uncoating under physiological conditions. Further studies can be designed based on these findings.
...
Asiasanat
Metadata
Näytä kaikki kuvailutiedotKokoelmat
- Pro gradu -tutkielmat [29559]
Samankaltainen aineisto
Näytetään aineistoja, joilla on samankaltainen nimeke tai asiasanat.
-
Extracellular albumin and endosomal ions prime enterovirus particles for uncoating that can be prevented by fatty acid saturation
Ruokolainen, Visa; Domanska, Aušra; Laajala, Mira; Pelliccia, Maria; Butcher, Sarah J.; Marjomäki, Varpu (American Society for Microbiology, 2019)ABSTRACT There is limited information about the molecular triggers leading to the uncoating of enteroviruses under physiological conditions. Using real-time spectroscopy and sucrose gradients with radioactively labeled ... -
Development of novel probes for enterovirus B group to study uncoating and infection
Martikainen, Mari (University of Jyväskylä, 2016)Enterovirus B group (EV-B) viruses are important human pathogens which cause a variety of diseases from mild respiratory illnesses to more severe acute infections such as myocarditis and meningitis. EV-Bs have also ... -
Cell entry and early infection of Echovirus 30
Kantoluoto, Tino Ville Valtteri (2020)Enterovirukset ovat pieniä ja vaipattomia positiivisen RNA genomin omaavia viruksia, jotka infektoivat pääasiassa ruoansulatuskanavan epiteelisoluja, mutta voivat muihin kudoksiin levitessään aiheuttaa erilaisia sairauksia. ... -
Structural Studies Reveal that Endosomal Cations Promote Formation of Infectious Coxsackievirus A9 A-Particles, Facilitating RNA and VP4 Release
Domanska, Aušra; Plavec, Zlatka; Ruokolainen, Visa; Löflund, Benita; Marjomäki, Varpu; Butcher, Sarah J. (American Society for Microbiology, 2022)Coxsackievirus A9 (CVA9), an enterovirus, is a common cause of pediatric aseptic meningitis and neonatal sepsis. During cell entry, enterovirus capsids undergo conformational changes leading to expansion, formation of large ... -
Early entry events in Echovirus 30 infection
Vandesande, Helena; Laajala, Mira; Kantoluoto, Tino; Ruokolainen, Visa; Lindberg, A. Michael; Marjomäki, Varpu (American Society for Microbiology, 2020)Echovirus 30 (E30), a member of the enterovirus B species, is a major cause of viral meningitis, targeting children and adults alike. While it is a frequently isolated enterovirus and the cause of several outbreaks all ...
Ellei toisin mainittu, julkisesti saatavilla olevia JYX-metatietoja (poislukien tiivistelmät) saa vapaasti uudelleenkäyttää CC0-lisenssillä.