Interactions of PP2A inhibitor proteins with PP2A regulatory subunits

Fosfataasit ovat tärkeitä solun sisällä tapahtuvan säätelyn kannalta. Proteiinifosfataasi 2A (PP2A) on yksi näistä säätelijöistä ja sen normaali toiminta liittyy solusyklin aktivointiin. Kun PP2A:n normaalia toimintaa häiritään, voi sen seurauksena ilmetä erilaisia sairauksia, kuten syöpää. PP2A:n toimintaa estävien inhibiittoriproteiinien on huomattu olevan mahdollinen syy tähän häiriöön. Inhibiittoriproteiinien, kuten fosfoproteiini/-endosulfiini perheen proteiinien ja Cancerous Inhibitor of PP2A (CIP2A) on huomattu estävän PP2A:ta, mutta niiden sitoutumismekanismeista PP2A:n tiedetään vähän. PP2A on heterotrimeerinen proteiini ja se koostuu tuki-, säätelijä- ja katalyyttisestä alayksiköstä. PP2A:n säätelyalayksikkö B:n sisällä on tavattu ainakin 23 erilaista isoformia. Tässä tutkimuksessa inhibiittoriproteiinien sitoutumista mitataan kolmeen eri PP2A B alayksiköön B56, B56 ja B56ε. Fosfoproteiini/-endosulfiini perheen inhibiittoriproteiinien sitoutumisvoimakuutta tutkitaan kahden erilaisen fosforylaatiota matkivan mutaation avulla. Ensin B alayksikön proteiinit tuotettiin ja puhdistettiin, ja niiden proteiiniproteiini vuorovaikutuksia tutkittiin microscale thermophoresis menetelmällä. Tulokset osoittivat, että fosfoproteiini/- endosulfiini perheen villityyppi proteiinit sitoutuivat kaikkiin tutkittuihin B56 alayksiköihin. CIP2A:n sitoutuminen oli vaihtelevaa. Fosforylaatiota matkivat mutaatiot lisäsivät sitoutumisvoimakkuutta cAMP-regulated phosphoprotein 19 kDa (ARPP19) ja cAMP-regulated phosphoprotein 16 kDa (ARPP16) kohdalla, mutta ei alfa-endosulfiinin (ENSA) kanssa.